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前瞻2025版中國藥典 | 譜育科技中藥中馬兜鈴酸A檢測解決方案
聚光 發(fā)布時間：2024-10-31 聚光 來源：微信公眾號 聚光 瀏覽量：3696



2022年12月發(fā)布的《中國藥典（2025 年版）編制大綱》明確提出要重點研究建立基于中成藥中馬兜鈴酸不得檢出的檢測方法，由此中藥中馬兜鈴酸的檢測愈發(fā)成為行業(yè)關(guān)注的焦點。


馬兜鈴酸主要存在于馬兜鈴科的馬兜鈴屬和細(xì)辛屬植物中，具有腎毒性、致突變及致癌性，被列為I類致癌物。其中，馬兜鈴酸A的毒性最強(qiáng)且廣泛存在于相關(guān)中藥材中。因此，建立有效的檢測方法，對加強(qiáng)含馬兜鈴酸A的中藥材及中成藥風(fēng)險評估，降低其對人體的危害有著重要作用。


檢測馬兜鈴酸的常用方法是高效液相色譜法（HPLC）和液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS/MS）法。HPLC 法通常適用于馬兜鈴酸成分含量相對高、干擾較少的中藥品種，而LC-MS/MS法具有專屬性強(qiáng)、靈敏度高、不易受干擾等優(yōu)勢，是靈敏檢測中藥中馬兜鈴酸的有效方法。



實驗儀器


EXPEC 5210  LC-MS/MS


樣品前處理

取馬兜鈴中藥材，粉碎機(jī)粉碎，50目過篩兩次，精密稱取0.2g，加70%甲醇20mL，超聲提取40 min，冷卻至室溫，用70%甲醇定容至25mL，精密吸取該溶液1mL，用50%甲醇稀釋并定容至25mL，精密吸取該溶液1mL，用50%甲醇稀釋并定容至 100mL，過 0.22μm 濾膜后，上機(jī)測定。

實驗條件

LC條件：流動相A，1mM甲酸銨-0.05%甲酸水溶液；流動相B，甲醇；流速，0.3mL/min；色譜柱，BEH C18（2.1x100mm，1.7μm ）；進(jìn)樣量 10μL；梯度，流動相A，0-2min, 45%；6min, 20%；6.1-8min，45%。

MS條件：運行模式ESI+，毛細(xì)管高壓 4 kV，去溶劑氣流量 10.0 L/min，反吹氣流量 0.8 L/min，去溶劑氣溫度 380 ℃，碰撞氣流量 0.45 mL/min，霧化氣流量 1.2 L/min。

方法檢測限和定量

配置 0.1 μg/L 濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，按照 S/N=10 和 S/N=3 計算定量限和檢出限，馬兜鈴酸檢測限為 0.0044 μg/L，定量限為 0.0149 μg/L。圖1為0.1 μg/L 馬兜鈴酸A的色譜圖。

圖1 0.1 μg/L 馬兜鈴酸A色譜圖

方法穩(wěn)定性

選擇3個不同濃度的馬兜鈴酸A標(biāo)準(zhǔn)品，連續(xù) 6 針進(jìn)樣，考察方法穩(wěn)定性，結(jié)果見表1。

表1 中藥馬兜鈴樣品測定結(jié)果色譜圖

藥材樣品加標(biāo)回收率

在中藥馬兜鈴樣品加標(biāo)濃度分別為 1 μg/L、10 μg/L、50 μg/L，每個濃度平行測定 3 次，回收率測定結(jié)果分別為 86.7%，87.8% 和 98.2%。

馬兜鈴藥材樣品測定

中藥馬兜鈴樣品色譜圖和檢測結(jié)果分別見圖2和表2。

圖2 中藥馬兜鈴樣品色譜圖

表2 中藥馬兜鈴樣品測定結(jié)果

實驗結(jié)論

本文使用聚光科技自主孵化子公司譜育科技的EXPEC 5210 LC-MS/MS建立了檢測中藥馬兜鈴中的馬兜鈴酸A的方法，方法檢測速度快、靈敏度高、穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確可靠，可用于進(jìn)行中藥中馬兜鈴酸A的檢測。



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